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賽默飛實時熒光定量pcr儀特點

發(fā)布時間:2025/5/20點擊次數(shù):12

賽默飛QuantStudio™系列實時熒光定量PCR儀(Real-Time PCR System),是Thermo Fisher Scientific公司推出的一款常用于分子生物學(xué)、臨床研究及疾病檢測的高精度核酸定量分析設(shè)備。其代表型號之一為 QuantStudio™ 5(Q5),具有廣泛的適用性和較高的數(shù)據(jù)準(zhǔn)確性。


一、基本原理

實時熒光定量PCR(qPCR)是在傳統(tǒng)PCR基礎(chǔ)上引入熒光探針或染料,實時監(jiān)控擴增產(chǎn)物累積量的技術(shù)。通過熒光強度變化計算樣品中靶標(biāo)核酸的初始濃度,常用于:

  • 基因表達定量

  • SNP分型

  • 微生物載量檢測

  • 藥物反應(yīng)分析

  • 腫瘤突變篩查

QuantStudio™系列的核心在于 精準(zhǔn)的熱控系統(tǒng)與高靈敏熒光檢測模塊,配合自動分析軟件,提高了實驗效率與數(shù)據(jù)可信度。


二、QuantStudio™ 5 核心特點

模塊技術(shù)特性
熱循環(huán)系統(tǒng)升溫速率高(可達6.5°C/s),控溫均一性±0.25°C
熒光檢測4通道或6通道,支持SYBR、TaqMan探針、FAM/VIC等染料
通量支持96孔標(biāo)準(zhǔn)孔板 / 384孔高通量
軟件控制支持本地軟件與Thermo Cloud Connect平臺遠程操作
數(shù)據(jù)分析自動Ct值判讀、標(biāo)準(zhǔn)曲線、SNP/HMR等模塊
用戶界面直觀觸屏操作,支持多用戶賬戶管理

三、適用場景

  1. 基礎(chǔ)科研

    • mRNA表達量對比

    • siRNA敲低效率檢測

    • 病原體檢測與驗證

  2. 臨床研究

    • 微量病毒載量分析

    • 基因突變與拷貝數(shù)變異(CNV)檢測

    • 用藥基因型篩選

  3. 農(nóng)業(yè)與食品檢測

    • 轉(zhuǎn)基因成分檢測

    • 病害抗性基因篩選

  4. 環(huán)境安全監(jiān)測

    • 土壤/水體中微生物定量

    • 工業(yè)殘留物的生物痕跡檢測


四、選型建議

根據(jù)應(yīng)用類型

  • 初級科研/教學(xué)實驗室:建議選擇96孔、4通道配置,滿足基礎(chǔ)qPCR需求;

  • 基因突變/多染料檢測實驗:推薦6通道型號;

  • 高通量檢測(如樣品>300/天):選擇384孔版本,提高效率。

根據(jù)預(yù)算與擴展性

  • Q5在QuantStudio™系列中為中端配置,性能穩(wěn)定,價格適中;

  • 若未來考慮自動化對接或樣品條碼化管理,可考慮QuantStudio™ 7 Flex及以上型號。


五、操作流程簡述

  1. 樣品準(zhǔn)備:提取DNA/RNA,反轉(zhuǎn)錄為cDNA(如檢測mRNA)

  2. 反應(yīng)液配制:根據(jù)染料(SYBR/TaqMan)配比混合引物、酶、緩沖液等

  3. 上機設(shè)置:選擇合適的熱循環(huán)參數(shù)及熒光采集方案

  4. 數(shù)據(jù)讀取與分析:導(dǎo)出Ct值,繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線,進行表達量比較


六、維護與支持

  • 定期進行通道校準(zhǔn)、熱蓋壓力測試

  • 可選配遠程診斷支持與云端數(shù)據(jù)存儲

  • 提供完整中文操作手冊及培訓(xùn)課程


如你需要深入了解QuantStudio™ 5與其他型號對比、使用過程中注意事項或采購建議


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